Pöördtranskriptsiooni PCR (RT-PCR)

Kvalitatiivne

Näitaja kohta

Pöördtranskriptsiooni PCR (RT-PCR) on molekulaardiagnostiline meetod, mis tuvastab spetsiifilist RNA-d. See on oluline viiruste (näiteks SARS-CoV-2), pähklite ja teatud vähi markerite avastamisel. Meetod võimaldab tuvastada väga väikestes kogustes esinevat RNA-d, muutes selle väga tundlikuks diagnostiliseks tööriistaks.

Funktsioon
  • RNA molekulide tuvastamine ja kvantifitseerimine.
  • Spetsiifiliste viiruste või geeniekspressiooni tase diagnostika.
  • Kõrge tundlikkus ja spetsiifilisus.
Põhimõte
  • RNA pöördtranskriptsioon DNA-ks (cDNA) ensüümi abil.
  • cDNA paljundamine PCR (polümeraasi ahelreaktsiooni) abil.
  • Tulemuse tuvastamine fluorestsentssignaalide abil reaalajas.
Protseduur
  • Proovi kogumine (näiteks nina- või kurkuõpik, veri, limaskest).
  • RNA ekstraheerimine proovist.
  • RNA teisendamine komplementaarseks DNA-ks (cDNA) pöördtranskriptaasi ensüümi abil.
  • cDNA paljundamine spetsiifiliste praimerite ja polümeraasi abil.
  • Tulemuste analüüs reaalajas PCR seadme abil, mis tuvastab fluorestsentssignaali.
Tähendus
  • Tuvastatud spetsiifiline RNA sihtproovist.
  • Näitab aktiivset viirusinfektsiooni või spetsiifilise geeni ekspressiooni.
  • Võib olla seotud haiguse esinemisega (nt COVID-19, grip).
Meditsiinilised olukorrad
  • Viirusinfektsioonide kahtlus (nt COVID-19, grip, viiruste hepatiit).
  • Pähklite või vähi molekulaarmarkerite tuvastamine.
  • Geenitegevuse uuringud teadustöös või indiviidilise meditsiini kontekstis.
Spetsialistid
  • Infektsionist (infektsioonihäirete eriarst)
  • Molekulaardiagnostika labori spetsialist