Polümeraasi ahelreaktsioon (PCR)
Kvalitatiivne
Näitaja kohta
Polümeraasi ahelreaktsioon (PCR) on molekulaardiagnostika meetod, mis võimaldab kiiresti ja täpselt paljundada ning tuvastada spetsiifilisi DNA või RNA järgusid. Seda kasutatakse laialdaselt nakkushaiguste diagnoosimisel, geneetiliste muutuste tuvastamisel ja füüsikalises antropoloogias.
Funktsioon
- DNA või RNA spetsiifiliste fragmentide paljundamine (amplifitseerimine).
- Väga väikeste koguste patogeenide või geneetiliste markerite tundlik tuvastamine.
- Kasutatakse diagnoosimiseks, uuringuteks ja jälgimiseks.
Põhimõte
- Põhineb DNA kaheahelalise molekuli termotsüklilise denatureerimise ja ensümaatilise sünteesi tsüklitel.
- Kasutab sooliseid praimereid ja termostabiilset DNA polümeraasi.
- Iga tsükkel kahekordistab sihtjärjestuse kogust, saavutades eksponentsiaalse amplifikatsiooni.
Proovi võtmine
- Proovi tüüp sõltub indikatsioonist (nt nina-kurgunäärmepühitis, veri, sülg, koeosake).
- Proov kogutakse steriilsesse anumasse ja transporditakse laborisse vastavalt juhistele.
Labori protsess
- Proovist eraldatakse nukleiinhapped (DNA/RNA).
- Lisatakse reaktsioonisegu, mis sisaldab praimereid, ensüüme ja nukleotiide.
- Segu asetatakse termotsüklisse, kus toimuvad korduvad kuumutuse-jahtumise tsüklid.
- Pärast amplifikatsiooni analüüsitakse tulemusi elektroforeesi või teiste meetoditega.
Nakkushaigused
- Viiruste (nt SARS-CoV-2, gripp, HIV), bakterite (nt tuberkuloos) või parasiitide olemasolu proovis.
- Näitab aktiivset infektsiooni või patogeeni kandlust.
Geneetilised muutused
- Pärilike haiguste (nt tsüstiline fibroos) diagnostika.
- Kantserogeensete mutatsioonide tuvastamine (nt vähi riski hindamine).
- Isaduse või identiteedi määramine forensikas.
Muud põhjused
- Kontrollitud raviga seotud viiruse koormuse jälgimine (nt HIV, hepatiit).
- Toimeainete resistentsuse geenide tuvastamine.
Kliinilised sümptomid
- Nakkushaiguse kahtlus sümptomite (kuumus, köha, lõõgastus) puhul.
- Kontaktisiku testimine nakkushaiguse leviku piiramiseks.
- Enne plaaneeritud operatsiooni või ravi infektsiooni välistamine.
Spetsialistide soovitus
- Nakkushaiguste arst või mikrobioloog määrab uuringu täpse diagnoosi saamiseks.
- Onkoloog või geneetik võib tellida mutatsioonide analüüsi.
- Günekoloog või uroloog soovitab patogeenide tuvastamist kuse-suguteede infektsioonide korral.
Jälgimine ja uuringud
- Ravi efektiivsuse hindamine (nt viiruskoormuse mõõtmine).
- Teadusuuringutes bioloogiliste proovide analüüs.
Seotud uuringud
Otsi näitajat
Digitaalne PCR (dPCR)
Minimaalse jääkhajuse PCR-test (MRD-PCR test)
Multifokaalne PCR
Pöördtranskriptsiooni PCR (RT-PCR)
SARS-CoV-2 viiruse RNA test (PCR)
11-dehidrotromboksaani B2
11-deoksükortisool
13q deletsiooni uuring
14-3-3 valk CSF-is
16-alfa-hüdroksüestron
17-alfa-hüdroksüprogesteroon
17-hüdroksüprogesteroon
1q amplifikatsiooni uuring
2-hüdroksüestrioon
2-metoksüestron
2-tunnine glükoositaluvuse test
216 toidu intolerantsuse uuring
24 tunni uriinikreatiinini tase
24-tunnine Holteri monitorimine
24-tunnine pH-meetria